Purification Equipment foar Oligo suvering

1. Gel Electrophoresis Chromatography suvering
Brûk denaturearjende polyacrylamide gel elektroforese chromatografy foar suvering.It denaturearjende middel is oer it generaal 4M formamide of 7M urea, de konsintraasje fan acrylamide is tusken 5-15%, en it oanpart fan methacrylamide is benammen tusken 2-10%.
Nei elektroforese moat de posysje fan 'e nukleïnesûrband wurde bepaald ûnder de bestraling fan ultraviolet ljocht, de gel mei it doelnukleinsûr wurdt ôfsnien, it nukleïnesûr wurdt smiten en útlutsen, en dan wurdt de útlogingsoplossing konsintrearre, ûntsalt, kwantifisearre en lyofilisearre.

2. DMT-On, HPLC suvering
Kies de DMT-On-modus tidens de synteze, it rûge produkt waard sintrifugearre en konsintrearre by keamertemperatuer om oerstallige ammoniak nei de aminolyse te ferwiderjen.
Skieding waard útfierd mei help fan in C18 kolom mei acetonitril en 10% triethylamine-acetic acid (TEAA) as de eluent.Nei't de eluaasje foltôge is, wurdt it konsintrearre, en dan wurdt de DMT-groep fuortsmiten mei trifluoracetic acid.Nei neutralisaasje wurde guon sâlten en lytse molekulen fuortsmiten troch in ôfsnien buis, en úteinlik ûntsalt.

Dizze metoade kin krije in produkt mei hegere suverens, mar it is nedich om omtinken te jaan oan it foarkommen fan depurination.

3. DMT-Off, HPLC suvering
Kies de DMT-Off tidens de synteze, en it rûge produkt waard sintrifuge en konsintrearre by keamertemperatuer om oerstallige ammoniak nei ammonolyse te ferwiderjen.
Skieding waard útfierd mei help fan in C18 kolom mei acetonitril en 10% triethylamine-acetic acid yn wetter as eluent.Nei't de skieding foltôge en kwantifisearre is, wurde de aliquots lyofilisearre.

Dizze metoade fereasket soarchfâldige oanpassing fan skieding betingsten, en kin ek krije relatyf suver doel molekulen.