Yn 'e typyske synteze fan DNA, RNA en net-natuerlike nukleïnsoeren spilet de stap fan deprotection en koppeling krúsjale rollen.
De Deprotection-stap is om de DMT-groep op 'e fêste stipe of de 5'-hydroxylgroep op' e foarige nukleoside te ferwiderjen mei organyske soer, en de hydroxylgroep bleatsteld foar de folgjende koppelingsstap.De 3% trichloroacetic acid yn dichloromethane of toluene wurdt meast brûkt foar it útfieren fan de deprotection stap.De konsintraasje fan trichloroacetic acid en de deprotection tiid (deblocking tiid) dominearje de suverens fan de einprodukten.Lege konsintraasje en ûnfoldwaande deblocking tiid ferlit unreacted DMT groep, dy't ferminderje de opbringst en fergrutsjen de net winske ûnreinheden.De lange deblokkearjende tiid kin liede ta depurine fan synthesized sekwinsjes, it foarmjen fan de ûnferwachte ûnreinheden.
De Koppelingsstap is gefoelich foar de wetterynhâld fan oplosmiddelen en it focht yn 'e loft.De konsintraasje fan wetter yn 'e synteze moat minder wêze as 40 ppm, better minder as 25 ppm.Om de tastân fan wetterfrije synteze te hâlden, moat de synteze fan nukleïnesoeren wurde útfierd yn in omjouwing mei lege fochtigens, dus wy riede ús klant oan om deAmidites oplost apparatuer, dy't it poeierde of oaljeige Phosphoramidite yn wetterfrije acetonitril oplosse kin om kontakt mei loft te foarkommen.
Sûnt it oplossen fan phosphoramidites it is better op 'e net-wetter situaasje, en molekulêre fallen te adsorbearjen de spoaren wetter yn' e reagents en amidite, it is nedich om tariede deMolekulêre Traps.Wy advisearje 2 g subsieve foar 50-250ml reagensflessen, 5g foar 250-500ml reagensflessen, 10g foar 500-1000ml reagensflessen, en 20g foar 1000-2000ml reagensflessen.
It oplossen fan phosphoramidites moat wurde útfierd ûnder de inerte sfear, en it ferfangen fan activator reagents en acetonitril moatte wurde klear yn 'e tiid.De capping- en oksidaasjereagenzjes moatte sa gau mooglik brûkt wurde, de iepene reagenzjes jouwe minder hâldberens, en minder aktiviteit by synteze.
Post tiid: Aug-09-2022